誰能幫忙找到幾篇冉冉的集體DNA，最好是牡丹的

通過煮沸法提取DNA

試劑]緩衝液和溶液：用於篩選質粒的抗生素;氯黴素（34mg ml）; 選擇：乙醇; 異丙醇（

酶和緩衝液：溶菌酶（10mg ml）; 限制性核酸內切酶。

凝膠：瓊脂糖凝膠。

實驗操作過程]。

1.將500ml培養物的細菌沉澱重懸於10ml STET[（NaCl 10mmol L

特里斯·Cl （ EDTA （pH. 將懸浮液轉移到50ml Erlen燒瓶中。

2.加入1ml新鮮配製的溶菌酶溶液[10mg ml，沉澱於10mmolL中]。

如果溶液的pH值低於溶菌酶的pH值，則無法有效工作。

3.用夾子在酒精燈的明火上加熱燒瓶，直到液體剛開始沸騰，然後不斷搖晃燒瓶。

4.立即將瓶子浸入裝滿沸水的大燒杯（2L）中，然後將瓶子放入沸水中正好40s。

5.將瓶子浸入用冰預冷的水中5分鐘冷卻。

6. 將粘性內容物從瓶子轉移到超速離心管中，濃度為 4 至 30

以 000 rpm 離心 30 分鐘。 原始細菌材料生長得越緻密，將粘性裂解物轉移到離心管的難度就越大。 如有必要，可以用長刀片和剪刀將裂解物切成適當大小的大塊，或者通過拉入10ml注射器的槍管中部分剪下。

當從用氯黴素處理的細菌培養物中分離質粒DNA時，這通常不是問題。 如果細菌碎片沒有形成緊密的團塊，則以 35,000 rpm 的速度再離心 20 分鐘，然後盡可能將上清液轉移到另乙個試管中，丟棄留在試管中的粘性液體。

7.將上清液轉移到另乙個試管中並純化質粒DNA。

原理]將細菌懸浮在含有溶菌酶的緩衝液中，該溶菌酶消化細胞壁，然後加熱至100°C以使其裂解。除了破壞細菌的外壁外，加熱還有助於解開DNA鏈的鹼基配對，使蛋白質和染色體DNA變性。 但是閉環質粒DNA鏈不會彼此分離，因為它們的磷酸二酯骨架具有相互交織的拓撲結構。

當溫度下降時，閉環DNA的鹼基就位，形成超螺旋分子。 離心除去變性染色體DNA和蛋白質，可以從上清液中回收質粒DNA。